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        高二下冊(cè)生物酵母細(xì)胞的固定化知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

        字號(hào):

        1.(酵母細(xì)胞的固定化)基礎(chǔ)知識(shí)
            ⑴.(有哪些?固定化酶應(yīng)用的實(shí)例?
            ①.用于高果糖漿的生產(chǎn);
            小資料:高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿;
            可以作為蔗糖的替代品;
            對(duì)人類健康有益,不會(huì)引起肥胖、糖尿病心血管疾病。
            ②.怎樣生產(chǎn)高果糖漿?
            A.原料:葡萄糖;
            B.酶:葡萄糖異構(gòu)酶(穩(wěn)定性好,能持續(xù)發(fā)揮作用。);
            C.方法:使用固定化技術(shù),將酶固定在顆粒狀載體上;
            將酶顆粒裝到反應(yīng)柱內(nèi)(如圖4-5);
            將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱上端注入;
            與酶接觸,發(fā)生反應(yīng),生成果糖;
            生成果糖從反應(yīng)柱下端流出。
            ⑵.(什么是)固定化細(xì)胞技術(shù)?
            固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù);
            包括:包埋法;
            化學(xué)結(jié)合法(將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合,或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上);
            物理吸附法;
            ①.一般來說,酶更適合哪種方法固定化?為什么?
            化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化;
            因?yàn)槊阜肿虞^小;
            ②.一般來說,細(xì)胞更適合用哪種方法固定化?為什么?
            細(xì)胞多采用包埋法固定化;
            因?yàn)榧?xì)胞體積較大。
            ③.化學(xué)結(jié)合法常用的載體有哪些?
            明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維、聚丙烯酰胺等等
            ④.選擇哪種載體包埋酵母菌細(xì)胞?
            選用海藻酸鈉作載體包埋酵母細(xì)胞;
            2.(酵母細(xì)胞的固定化)實(shí)驗(yàn)操作(包括哪些內(nèi)容?)
            ⑴.(怎樣進(jìn)行)酵母菌細(xì)胞的活化?
            稱取1g干酵母,放入50mL的小燒杯中,加入蒸餾水10mL,用玻璃棒攪拌,使酵母菌細(xì)胞混合
            均勻,成糊狀,放置1h左右,使其活化。
            ⑵.(怎樣)配制物質(zhì)量濃度為0.025mol/L的CaCl2溶液?
            稱取無水CaCl20.83g,放入200mL的燒杯中,加入150mL的蒸餾水,使其充分溶解,待用。
            ⑶.(怎樣)配制海藻酸鈉溶液?
            稱取0.7g海藻酸鈉,放入50mL小燒杯中,加入10ml水,酒精燈加熱,邊加熱邊攪拌,將海藻
            酸鈉調(diào)成糊狀,直至完全溶化,用蒸餾水定容至10mL。
            注意:加熱時(shí)要用小火,或者間斷加熱,反復(fù)幾次,直到海藻酸鈉溶化為止。
            ⑷.(怎樣將)海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合?
            將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已活化的酵母菌細(xì)胞,進(jìn)行充分?jǐn)嚢?,使其混?BR>    均勻,再轉(zhuǎn)移至注射其中。
            ⑸.(怎樣)固定化酵母菌細(xì)胞?
            以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中,觀察液滴在CaCl2溶液中
            形成凝膠珠的情形。
            將這些凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。
            3.(怎樣)用固定化酵母菌發(fā)酵?
            ⑴.將固定化好的酵母菌細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗2~3次;
            ⑵.將150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL的錐形瓶中,再加入固定好的酵母菌細(xì)胞,
            置于25℃下發(fā)酵24h。
            4.(酵母細(xì)胞的固定化實(shí)驗(yàn))操作提示
            ⑴.海藻酸鈉在水中溶解速度較慢,需要通過加熱促進(jìn)其溶解;
            ⑵.溶解海藻酸鈉,采用小火間斷加熱的方法,并不斷攪拌;
            ⑶.加熱太快,海藻酸鈉會(huì)焦糊。