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        2011微生物與寄生蟲檢驗(yàn)知識輔導(dǎo):自臨床標(biāo)本中直接檢查抗原

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            深部真菌感染者血中難于培養(yǎng)出菌體,尤其是絲狀真菌菌體常粘附、纏繞于組織,血中不易出現(xiàn)。但組織中菌體可溶性抗原可吸收入血自血、尿或感染組織液中直接檢查真菌抗原為快速診斷的重要手段;雖也可檢查抗體,但難達(dá)快速診斷。
            檢測念球菌屬的甘露聚糖及其抗原。
            1.膠乳凝集試驗(yàn)(Sanofi Diagnostics Pasteur公司)
            取300μl血清,加100μlEDTA處理液,混勻,煮沸3min,離心10000×g10min,取上清40μl加10μlSanofi膠乳粒子,3min內(nèi)出現(xiàn)凝集為陽性。
            2. EIA法。以單抗包被酶標(biāo)板,用雙抗體夾心法檢查血清中念球菌抗原(Behring Diagrostics公司試劑)
            3.檢測血中的白色念球菌的甘露聚糖抗體。ENA法檢查中甘露聚糖對念珠菌感染的診斷敏感性40%,特異性98%,ENA法檢查甘露聚糖抗體對念珠菌感染的診斷敏感性53%,特異性94%。
            4.檢查血清中D-阿拉醇或D-阿拉伯醇與L-阿拉伯醇的比值可快速診斷念珠菌病。Yeo等用基因重組的D-阿拉伯醇脫氫酶以酶熒光法定量,發(fā)現(xiàn)念珠菌感染者血清中來自菌體的D-阿拉伯醇明顯升高,用此法迅速論斷新生兒的侵襲性念珠菌病。
            Mitsutake等比較了自39名深部念珠菌病患者血液中檢出抗原的四種方法。應(yīng)用斑點(diǎn)印跡法檢查其烯醇化酶(Enlase)抗原的陽性率71.8%,特異性100%;應(yīng)用膠乳凝集檢查熱敏性糖蛋白抗原陽性率76.9%,特異性87.5%;應(yīng)用膠乳凝集檢查甘聚糖抗原陽性率75.6%,特異性100%,應(yīng)用鱟試試驗(yàn)檢查細(xì)胞壁組分β-Glucan的陽性率84.4%,特異性87.5%。